临床检测CK-MB结果比CK还要高？原因是...

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                    <p>来源：迈瑞客户服务中心</p><p><br  /></p><section><p><span><strong>作者 | 倪晓杰</strong></span><br  /></p></section><p><p><img src="image/20200927/4bbf163d790d04b7bb1774aa4e164107_1.png" /></p></p><section data-role="outer" label="Powered by gulangu"><section data-role="paragraph"><section data-role="outer" label="Powered by gulangu"><section data-role="paragraph"><section data-role="paragraph"><p><br  /></p></section><section data-tools="gulangu" data-id="94039"><section><section><section data-width="95%"></section><section><p><img src="image/20200927/27c4bbfdc11ed038cb22c22ce830ed3d_2.png" /></p></section><section data-width="45%"></section></section><section><section data-autoskip="1"><p><strong><span>肌酸激酶（CK）</span></strong><span>及<strong>血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）</strong>是重要的心肌标志物，主要用于急性心肌梗死诊断及心肌梗死面积评估。</span><span>在临床检测中，有时会出现生化检测报告中CK-MB结果比CK还要高倒置的情况，作为结果的接收及审核者，检验科老师若对该情况没有很好的认知，时常会产生困惑，怀疑是试剂或者仪器的问题，影响日常报告的发送；</span><span>同时异常的结果也会给临床医生造成一定误导，导致过度检查、误诊和误治。</span><span></span></p></section></section><section><section><p><img src="image/20200927/27c4bbfdc11ed038cb22c22ce830ed3d_3.png" /></p></section><section><p><img src="image/20200927/faa4e8e2eae7aeaded0228089d963851_4.png" /></p></section></section></section></section><p><br  /></p><p><span>笔者作为一名体外诊断产品临床应用专员，也曾在不同科室中接收到类似的反馈，下面结合实际的工作经验跟大家一起做下简单探讨。</span><br  /></p><p><br  /></p><section data-tools="gulangu" data-id="94808"><section><section data-original-title="" title=""><strong><span>1</span></strong></section><section><section data-brushtype="text"><span><strong>血清CK的组成及分布</strong></span></section></section></section></section><p><br  /></p><p>首先需要了解下CK，CK是一个与细胞内能量转运、肌肉收缩、ATP再生有直接关系的重要激酶。CK是由M型和B型2个亚单位组成的二聚体，主要是有CK-MM、CK-BB和CK-MB 三种同工酶。CK-BB主要存在于平滑肌和脑组织中，血清中含量极少，CK-MB主要存在于心肌组织中，占血清中CK的0～4%，CK-MM主要存在于骨骼肌中，占血清中CK的95%以上；因此，在健康的个体中检测到的总CK活性主要是CK-MM活性，其它的CK同工酶或变异体只有微量或检测不到。</p><p><br  /></p><p><p><img src="image/20200927/c4023224e3c342ba01c985ab0bf70349_5.png" /></p></p><p><br  /></p><section data-tools="gulangu" data-id="94808"><section><section data-original-title="" title="" data-num="2"><strong><span>2</span></strong></section><section><section data-brushtype="text"><span><strong>生化CK、CK-MB检测原理</strong></span></section></section></section></section><p><br  /></p><p>其次要了解到目前行业中生化检测CK及CK-MB的主流方法，CK检测多使用IFCC推荐法测定总CK活性，CK-MB检测则多使用免疫抑制法测定CK-MB活性，其原理为抗M亚基多（单）克隆抗体可以和CK-MM及CK-MB中的M亚基形成抗原抗体复合物，使得CK-MM酶活性完全被抑制，CK-MB因有50%为M型亚基，被抑制50%，而CK-BB不受影响，此时默认血清中无CK-BB或仅有微量；通过速率法测定B亚基的酶活性，将测得值乘以2可以认为大致代表CK-MB的活性。</p><p><br  /></p><p>整个反应过程可参考如下：</p><p><br  /></p><p><p><img src="image/20200927/a996c6071f088e67e9a907272cd9a20d_6.png" /></p></p><p><br  /></p><section data-tools="gulangu" data-id="94808"><section><section data-original-title="" title="" data-num="3"><strong><span>3</span></strong></section><section><section data-brushtype="text"><span><strong>异常结果产生因素分析</strong></span></section></section></section></section><p><br  /></p><p><span><strong>1、试剂因素：</strong></span>主要表现为试剂污染或使用已过有效期的试剂，部分科室日常CK-MB检测标本量较小，因此一瓶试剂往往会长期多次使用，存在倒瓶操作，有试剂污染的风险；同时不排除部分客户，对试剂成本比较关注，对已过有效期的试剂舍不得废弃，存在使用过期试剂的现象，导致检测结果异常；此类情况只要科室室内质量控制做的比较到位，日常监测质控的情况下，一般都能发现进而避免。</p><p><br  /></p><p><span><strong>2、仪器因素：</strong></span>主要表现为仪器日常维护保养不到位，存在部分反应杯杯空白异常或管路污染；此类情况一般会在多项目中体现异常，所以一般都能发现进而避免。</p><p><br  /></p><p><span><strong>3、标本状态的干扰：</strong></span>若标本存在溶血情况，红细胞中的ADK（腺苷酸激酶）可与ADP反应，产生ATP，参与CK-MB检测中的第二步反应，对CK-MB的检测结果产生一定的影响。[1]</p><p><br  /></p><p><span><strong>4、标本中CK-BB干扰：</strong></span>正常情况下，CK-BB在血清中活性很低，可忽略不计，但部分脑部疾患及肿瘤患者，组织中CK-BB释放进入外周血，异常量的CK-BB可被检测，其B亚基活性同CK-MB中B亚基一起被检测，测定的CK-MB=CK-MB+2CK-BB，检测结果就会高于真实值，出现CK-MB活性大于CK总活性的情况。</p><p><br  /></p><p><span><strong>5、标本中异常免疫球蛋白干扰：</strong></span>血清中可能存在对CK-MB免疫抑制法检测有干扰的异常免疫球蛋白，产生免疫表位相似性干扰；该情况多出现于异质性恶性肿瘤患者，需要与临床科室进行及时沟通确认。</p><p><br  /></p><p><span><strong>6、标本中巨CK1、巨CK2干扰：</strong></span>巨CK1是CK同工酶与自身抗体的复合物，常见为CK-BB与IgG或IgA的复合物，也有少数是CK-MM与IgG或IgA的复合物，巨CK1常出现于50岁以上女性，多与肌炎、心血管疾病有关，如干燥综合症，进行性肌萎缩，急性药物中毒等；巨CK2是一种低聚线粒体CK，又称CK-Mt，存在于细胞的线粒体膜上，巨CK2常见于患恶性肿瘤或肝病的成人以及心肌病儿童，与恶性肿瘤密切相关。因巨CK1、巨CK2其活性不受抗CK-M抗体抑制，所以会被误识别成B亚基被检出，最终造成CK-MB活性假性升高。[2]</p><p><br  /></p><p><span><strong>7、试剂抗体浓度限制：</strong></span>当血液中CK含量过高时，试剂中抗CK-M抗体的量相对不足，导致抗体抑制作用不完全，使检测结果比实际结果高；该情况下总CK结果也会显示偏高，此时一般可采取生理盐水合理稀释样本后，进行再测定。</p><p><br  /></p><section data-tools="gulangu" data-id="94808"><section><section data-original-title="" title="" data-num="3"><span><strong>4</strong></span></section><section><section data-brushtype="text"><span><strong>识别手段或应对手段</strong></span></section></section></section></section><p><br  /></p><p><span><strong>I、CK-MB/CK比值：</strong></span>一般情况下正常人血清中CK的存在形式主要是CK-MM，只有少量CK-MB，不超过总活性的5%，心肌梗死发生时最高值也不超过38%。如果CK-MB/CK&gt;50%，且标本无溶血，一定要警惕有无巨CK或CK-BB的存在。[3]</p><p><br  /></p><p><span><strong>II、琼脂糖凝胶电泳分析：</strong></span>使用可疑血清进行琼脂糖凝胶电泳结合荧光染色扫描分析，可见巨CK1条带位于CK-MM与CK-MB之间，巨CK2条带位于CK-MM的阴极侧。</p><p><p><img src="image/20200927/8409f1982c95f41d8cbc4a90422cc2a0_7.png" /></p></p><section><span>肌酸激酶电泳条带图</span></section><section><span>（※配图来源于网络）</span></section><p><br  /></p><p><span><strong>III、热失活法：</strong></span>将可疑血清置45℃环境下20min后，发现CK-BB、CK-MB几乎完全失活，而巨CK则影响不明显。[2]</p><p><br  /></p><p><span><strong>IV、其他方法学：</strong></span>CK-MB测定除免疫抑制法外，目前多在发光平台上测定CK-MB质量（CK-MBmass），通过抗CK-MB单克隆抗体特异性的识别CK-MB，不受上述影响因素中CK-BB及巨CK等因素干扰。[4]</p><p><br  /></p><section data-tools="gulangu" data-id="94808"><section><section data-original-title="" title="" data-num="3"><span><strong>5</strong></span></section><section><section data-brushtype="text"><span><strong>讨论</strong></span></section></section></section></section><p><br  /></p><p>随着近年免疫化学发光技术的飞速发展，目前生化项目中已有越来越多的项目可同时在发光平台开展，例如β2-MG、PG I、PG II、TnI、MYO等，这些项目在生化检测中多使用乳胶免疫比浊或增强型乳胶免疫比浊法，但不管是直接发光/间接发光/电化学发光平台，灵敏度及抗抗干扰能力等均明显优于生化法，其中TnI 、MYO与CK-MBmass常作为心梗三项日常开展，生化检测中则对应日常开展心肌酶谱五项，各自均有对应的优势，科室需要对检测成本、检测人群、临床需求等多个方面进行综合考虑，合理使用检测方法。</p><p><br  /></p><p>而针对本文的主角CK-MB，建议免疫抑制法测定CK-MB可作为一项初筛试验，因其检测方法的局限性易受各种因素干扰，若异常标本临床也不支持急性心肌梗死的诊断，要警惕有无巨CK或CK-BB存在，应进一步做电泳法鉴定CK同工酶，或用免疫发光法测定CK-MB质量(CK-MBmass)，以明确病因及诊断。</p><p><br  /></p><p><br  /></p><p><strong>参考文献</strong></p><p><span>[1] 王霞，逄雪，于维林。探讨消除溶血对CKMB检测的影响[J]。医学检验与临床，2006年第17卷第4期。</span></p><p><span>[2] 白志瑶，李晓东，王军，等。巨CK对免疫抑制法测定CK-MB的干扰及鉴别[J]。中国误诊学杂志，2003,3(6):859-860。</span></p><p><span>[3] 庞丹凤，冯献光，林芝锋，罗元标。CK-MB/CK比值倒置56例CK-MB质量检测结果分析[J]。临床合理用药杂志，2012年第10期。</span></p><p><span>[4] 陈建芸，石玉玲，李林海，等。血清CK-MB质量及其活性检测结果对比分析[J]。华南国防医学杂志，2010年12月28日第24卷第6期。</span></p><p><br  /></p></section></section></section></section><p><br  /></p>